J Clin Invest：探究USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

囊状脑瘤（GBM）是最常见和破坏官能的人脑恶官能，其特质在于国际上的内异质官能。尽管已经有在多来进行疗程方面取得了的发展，但GBM症状的结果几乎令人震惊懊恼。GBM拥有一个细胞内亚群，称为GBM骨髓（GSCs），兼具自我更最初活官能和多向其发展意念以及起始并能。因此，迫切需要探索针对GSC的最初疗程策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族构成19种酶，它们将内源和小分子醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体细胞内的各种生理过程。越来越多的证据声称，ALDH1A3在肺癌骨髓（CSCs）中都表现造出极低活官能，并影响这些钙离子的各种生一物学特质。在GBM中都，已断定ALDH1A3作为保持稳定之间充质（MES）GSC的自我更最初和致瘤官能的关键分子。然而，MES GSCs中都ALDH1A3失调的有助于几乎是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一医学院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上刊载题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，断定USP9X是一种显然的DUB，可通气ALDH1A3多IL-化和稳定化。并且，USP9X是预报ALDH1A3hi MES GSCs富集的关键分子，是MES GSCs自我更最初和致瘤官能所必需的。同时还评估了USP9X抑制对症状来源的MES GSC梦魇超级任天堂模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3酶是否被IL- - 酶酶体该系统（UPS）翻译后操控，研究课题医护人员首先适用放线菌酮（CHX）阻断酶质从头合成并HEK293T细胞内和正常人星形囊状细胞内（NHAs）中都的ALDH1A3酶质水平。本来，ALDH1A3在CHX处理的8小时内慢慢地水解并几乎检查足足。此外，用酶酶体抑制MG-132处理细胞内造成了ALDH1A3酶水平相比较提极低。这些数据声称ALDH1A3通过UPS水解。接下来，研究课题医护人员设法断定统筹ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并适用载体HEK293T细胞内中都的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi筛选。该研究课题初始筛选断定了与ALDH1A3隐含涉及的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞内中都的ALDH1A3共隐含时，断定只有USP9X必须与抑制ALDH1A3反之亦然粒子，从而暗示USP9X是操控ALDH1A3稳定官能的相比较候选一物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或裂解失活的基因体C1566A USP9X（在裂解结构域的一个关键胆红素中都携带点基因）转染到HEK293T细胞内中都。 WT USP9X而非C1566A基因体的隐含以剂量依赖官能方式将提极低ALDH1A3酶水平，声称USP9X以依赖于其DUB活官能的方式将通气ALDH1A3。囊状脑瘤（GBM）骨髓（GSC）的之间充质（MES）亚型代表癌细胞内亚群，其因其极低度侵袭官能和对同样疗法的其会而闻名于世。已经有已提造出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为保持稳定GSC的MES特质的关键决定因素。然而，默许异常ALDH1A3隐含的有助于几乎或许。在该研究课题中都，研究课题医护人员断定IL-特异官能酶酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的显然去IL-化酶。 USP9X与ALDH1A3粒子，解聚并稳定化。此外，研究课题结果显示FACS分选的USP9Xhi细胞内富集兼具极低ALDH1A3活官能和有效官能致瘤并能的MES GSC。USP9X的消耗相比较上调ALDH1A3，造成了MES GSC的自我更最初和致瘤并能的丧失，这可以通过ALDH1A3的特异官能隐含得到很大层面的挽回。此外，研究课题医护人员还证明USP9X抑制WP1130诱导ALDH1A3水解并且在MES GSC衍生的原处梦魇超级任天堂模型中都显示造出相比较的疗程功效。另外，USP9X与原发官能人GBM样品中都的ALDH1A3隐含反感涉及，并且对于兼具MES亚组的症状兼具临床表现经济效益。总的来说，研究课题结果揭示了USP9X作为ALDH1A3酶稳定化的关键去IL-化酶和GSC定向疗程的潜在各种因素。原始中都有：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019